问：我有个药品检验方面的问题，请相关专业的朋友给个解答好么，谢谢了:
中成药类的降糖药里面加了化学降糖如格列本脲等如何用简单的化学方法检验出来？
答：中药保健品中非法掺入格列本脲的检测
夏铮铮1＊，杨成钢2，张小松2，周琳2，范琦1＃1重庆医科大学，重庆市400016；2重庆市药品检验所，重庆市400015
中图分类号:R92711文献标志码:A文章编号:1001－0408（2006）04－0314－03
摘要:建立中药保健品中非法掺入化学成分格列本脲的定性、定量检测方法，为药监、药检部门提供参考。方法：采用薄层色谱法、高效液相色谱法对怀疑掺有格列本脲的荞芪胶囊的提取物进行分离分析，并采用高效液相色谱－二级管阵列检测法及直接电喷雾四级杆质谱技术对其进行定性鉴别，另采用高效液相色谱法测定其中格列本脲的含量。结果：供试品荞芪胶囊A、荞芪胶囊B均检出格列本脲，其含量分别为151、055mg/粒。结论：本方法专属性强、灵敏度高、操作简便，可作为监测掺有格列本脲中药保健品的有效方法。
关键词:中药保健品；荞芪胶囊；格列本脲；薄层色谱法；高效液相色谱法；质谱法
格列本脲（Glibenclamide，又名优降糖）是第2代磺脲类口服降糖药的代表，其疗效特点为降糖作用强、持续时间长[1]。目前，某些中药保健品生产厂家为增强降糖效果，在其生产的中药保健品中非法掺入化学药品格列本脲。为有效打击这种制假掺伪的不法行为，保障人民群众的用药安全，笔者参考有关文献[2～7]，建立了检测中药保健品中非法掺入格列本脲成分的方法，并运用该方法证实某厂家生产的中药保健品荞芪胶囊中违禁掺有成分格列本脲。本法对中药保健品中是否掺有格列本脲能快速、准确地作出判断，可供各药监、药检部门开展工作时参考。
1仪器与试药
11仪器
LC－2010Avp型高效液相色谱仪（带自动进样器），包括SPD－M10Avp二极管阵列检测器（日本岛津公司）；ZQ2000型四级杆质谱仪（美国Waters公司）；CSB－5L－180型超声清洗器（天津市考德斯科技有限公司）。
12试药
格列本脲对照品（中国药品生物制品检定所，批号：10135－0103）；荞芪胶囊A、B（北京市某医药保健品厂，批号：20040712）；硅胶G（青岛海洋化工厂，批号：9514）；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
21薄层色谱定性鉴别
分别取荞芪胶囊A、B样品内容物30g，各置于锥形瓶中，加氯仿50ml，超声处理30min，过滤，滤渣和滤器用氯仿20ml分次洗涤，合并洗液与滤液，置于水浴上蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，即得供试品溶液A、B。另取格列本脲对照品，加氯仿制成浓度为1mg/ml的溶液，即得对照品溶液。按薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以氯仿－环己烷－乙醇－冰醋酸（8∶13∶1∶1）为展开剂，上行展开，取出，晾干，置于紫外灯254nm波长下检视，结果供试品在与格列本脲对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，表明供试品中检出了格列本脲，色谱详见图1。
22高效液相色谱定性鉴别
221色谱条件：色谱柱为DiamonsilTMC18（250mm×46mm，5μm），流动相为甲醇－磷酸二氢铵溶液（500∶300；取磷酸二氢铵35507g，加水600ml溶解，用磷酸调节pH值至350±002），测定波长为274nm，流速为10ml/min，柱温为25℃，进样量为10μl。理论塔板数按格列本脲峰计应大于3000。
222对照品溶液的制备：准确称取格列本脲对照品适量，加氯仿溶解成浓度为01mg/ml的溶液，即得。
223供试品溶液的制备：分别取荞芪胶囊A、B各20粒内容物，研细，准确称取约06g，置于锥形瓶中，加氯仿50ml，超声处理30min，过滤，滤渣和滤器用氯仿20ml分次洗涤，合并洗液与滤液，置于水浴上蒸干，残渣加甲醇10ml分次溶解，转移至25ml容量瓶中，以流动相洗涤容器及残渣数次，洗液合并至容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即分别得供试品溶液A、B。
224鉴别反应：精密吸取“222”项下对照品溶液和“223”项下供试品溶液A、B，按“221”项下色谱条件注入高效液相色谱仪，依法测定。结果，供试品A、B色谱中出现与对照品色谱保留时间相同的色谱峰，另用二极管阵列检测器进一步确认此色谱峰为格列本脲，色谱详见图2、图3。
23直接电喷雾四级杆质谱技术定性鉴别
231质谱条件：采用电喷雾离子化源（ESI），以正离子检测，其中扫描范围为10000～32000m/s。
232质谱测定：取“222”、“223”项下溶液，依法测定，结果供试品A、B质谱中出现与对照品质谱相同的分子离子峰（质荷比为494），从而进一步确认供试品A、B中添加了格列本脲，质谱详见图4。
24定量测定
241线性关系考察：准确称取格列本脲对照品10mg，置于25ml容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。按“221”项色谱条件分别进样3、5、10、15、20、25、30、50μl，记录色谱，以峰面积积分值（Y）对浓度（X）进行线性回归，得回归方程Y=7090×103X＋3374×103（r=09995）。结果，格列本脲进样量在12μg～200μg范围内与峰面积积分值线性关系良好。
242精密度试验：取同一对照品溶液，按“221”项下色谱条件，连续进样6次。结果，格列本脲峰面积积分值的相对标准差为012％，表明方法精密度良好。
243稳定性试验：取“223”项下供试品A、B溶液，分别于0、2、4、8、10、12h时进样测定。结果，格列本脲峰面积积分值的相对标准差为13％，表明在12h内基本稳定。
244最低检测限和定量限考察：以流动相为空白溶液，与一定浓度的对照品溶液分别进样，输入空白溶液的噪音水平和对照品溶液的进样量后，仪器自动分析显示，信噪比（S/N）为30时，检测限为7ng；S/N为100时，定量限为24ng。
245加样回收率试验：准确称取已知含量的荞芪胶囊A、B各约3g，各准确加入高、中、低不同浓度的格列本脲对照品溶液，按“246”项下方法测定含量，计算回收率，结果荞芪胶囊A、B的平均回收率分别为1001％（RSD=06％，n=9）、997％（RSD=09％，n=9）。
246样品含量测定：分别精密吸取“222”项下对照品溶液和“223”项下供试品A、B溶液，按“21”项下色谱条件注入高效液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算。结果，供试品中格列本脲含量为：胶囊A151mg/粒；胶囊B055mg/粒。
3讨论
薄层色谱分离检视只能初步判断格列本脲是否存在，最终判断是否确是格列本脲尚需进一步试验证实。采用高效液相－二极管阵列检测法，通过保留时间和紫外图谱的比较，对证实非法掺入格列本脲起到决定性作用。有条件者再采用高效液相色谱－质谱联用或直接电喷雾四级杆质谱技术等手段深入分析，将更进一步确保结果准确无误。
荞芪胶囊说明书中称本品主要成分为荞麦、黄芪、山楂、葛根、女贞子、五味子，属天然植物成分，应不含格列本脲。根据《中华人民共和国药品管理法》第四十八条规定，在中成药中非法掺入西药成分，应作假药论处。
目前，笔者检出降糖中药保健品中非法掺入格列本脲的除荞芪胶囊外，还有糖尿乐胶囊、降糖宁胶囊和降糖胶囊，表明这并非个别现象，有关部门应加强对此类产品的查处。
参考文献
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（收稿日期：2005－03－01修回日期：2005－05－01）